混合菌修复石油污染土壤的方案

石油及其制品在生产、加工、运输和用于过程中产生的大量石油污染物转入环境，对土壤造成了相当严重污染，因此对石油污染土壤的管理已迫在眉睫。石油污染土壤治理技术中，与物理修缮、化学修缮技术比起，微生物修缮技术因其修缮效果好、操作者简单、费用较低、水解过程很快和无二次污染等特点，被普遍使用。微生物修缮技术的本质是通过微生物的新陈代谢活动将污染物水解，修复过程所用的微生物多为土著微生物；若要提升修缮效果，还须要引进驯养的高效石油水解菌。

　　比起于向量设计，均匀分布设计的主要优势是：在因素和水平数均较多的情况下，用较多的实验次数就可取得希望的结果，节省人力和物力，便于实行。目前，国内还少见将均匀分布设计法用作石油污染土壤微生物修缮技术的研究报导。本工作使用从东营石油污染土壤中富含、分离出的4种高效石油水解菌，对仿真石油污染土壤展开微生物修缮。

在单菌种用于效果不理想的情况下，研究了多种高效石油水解菌混合用于的效果，确认了各菌的最佳用料及菌群的拟合培育条件，并更进一步从化学系性质、酶活性和微生物种群数量方面较为了土壤经微生物修缮前后的变化，为东营石油污染土壤微生物修缮的现场应用于获取了技术参照和理论反对。　　1、实验部分　　1.1材料、试剂和仪器　　原油：山东省东营市某炼油厂；土壤：山东省东营市东营并未不受污染的浅层（5~25cm）土壤。

土壤经碎裂、除杂、混匀、筛分后，按原油与土壤质量之比1∶20混合均匀分布，做成仿真石油污染土壤（仿真土样），并将其密封储存在消毒牛皮纸袋内冷藏可用。　　LB培养基：酵母膏5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂15g/L；菌种（还包括根瘤菌（A）、节细菌（B）、嗜盐菌（C）和芽孢杆菌（D））：实验室贮藏；表面活性剂：主要成分为槐糖脂。　　PHS-3型酸度计：上海精密科学仪器有限公司；　　721型红外线分光光度计：北京光学仪器厂。

　　1.2实验方法　　1.2.14种单菌与土著微生物石油水解亲率的较为　　使用LB培养基贮藏4种单菌。将仿真土样按每份50g分别取出80个锥形瓶中，并将锥形瓶分为5两组，每组16个。所取其中4两组分别以50.0mL/kg的疫苗量重新加入A，B，C，D菌悬液，置放28℃恒温箱中。剩下1两组不加菌种，作为对再不实地考察土著微生物的修缮起到。

每间隔一段时间采样，使用重量法测定土壤试样中石油的含量，计算出来石油水解亲率。　　1.2.2优势菌群的建构和最佳用料的确认　　对4种菌展开2种、3种、4种的人组，分别将有所不同人组的混合菌按一定的疫苗量重新加入到仿真土样中，每组重新加入的混合菌菌悬液的总疫苗量皆为50.0mL/kg，各重新加入菌的疫苗量分别大于。在28℃的恒温箱中摆放40d后，测量土壤试样中石油的含量，计算出来石油水解亲率，从而建构出有优势菌群。

使用均匀分布设计法对优势菌群的用料展开优化。　　1.2.3培育条件优化实验挑选　　5个影响石油水解亲率的代表性因素：混合菌疫苗量、土壤含水率、鸡粪重新加入量、麦糠重新加入量和表面活性剂重新加入量，并将其掌控在有所不同水平，采行均匀分布设计实地考察各因素对修缮效果的影响。按确认的最佳用料将4种菌疫苗到石油污染土壤中，在28℃的恒温箱中摆放40d后，测量土壤试样中石油的含量，计算出来石油水解亲率。

　　1.3分析方法　　1.3.1土壤化学系性质测定方法　　使用电位法测定土样pH，水与土的体积之比2.5；重铬酸钾容量法测定仿真土样的有机质含量；半微量凯氏法测定仿真土样的总氮含量；钼锑外用比色法测量仿真土样的总磷含量。

本文来源：华体会体育app下载-www.cnerc-mm.com